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月季组培操作过程

时间:2009-08-23  来源:互联网  编辑:梧桐树  浏览:931次
培养程序无菌培养的建立选条从中国科学院中国农科院等级科研机构引进个月季优良品种,分别是“红双喜”“白雪山”“彩云”“和平”“皇冠”“金丝鸟”…生根与移栽月季嫩芽生长到定长度时,就应切割下来,转入生根培养基…选取生长健壮的当年生枝条,用饱满而未萌发的侧芽作为外植体…培养基的配制整个培养过程都可用ms培养基,诱导芽萌发所加的植物激素只需要ba种
月季组培操作过程

月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物,每年多次开花,而且香味怡人,在观赏植物中地位很高。另一大优点是分布极广,适应性强,栽培容易。使得月季无愧于“花中皇后”之美誉,古今中外文人墨客咏叹月季的佳作,不胜枚举。多伦县就是一个月季之乡,但品种比较单一,更新换代缓慢。随着组织培养技术的应用,多伦县农业技术推广中心于2000年11月引进组织培养全套设备,成功培育了大量优质月季组培苗,填补了市场空白,对加速新老品种更新换代,迅速普及名优新品种起到了重要作用。

   二、培养程序

   (一)无菌培养的建立

   (1)选条

   从中国科学院、中国农科院等一级科研机构引进6个月季优良品种,分别是“红双喜”、“白雪山”、“彩云”、“和平”、“皇冠”、“金丝鸟”。选取生长健壮的当年生枝条,用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。以枝条中段芽最好,因为接种后,中段芽第5天左右就能萌发,而基部和梢部的芽往往迟至15天才萌发。

   (2)培养基的配制

   整个培养过程都可用ms培养基,诱导芽萌发所加的植物激素只需要ba一种即可,每升用0.3~1.omg,6个品种均适用,只是萌发迟早有些差别。

   (3)清洗外植体

   采回的枝条切去叶,再剥去附在茎上的叶柄及皮刺,先整段用洗手刷沾浓洗衣粉水仔细刷洗,再用自来水冲洗,毛巾擦干,放置在小木板上,用利刀切成2~3厘米一段,每段至少一个侧芽,装入消毒过的培养皿,放在超净工作台上,打开紫外灯,做表面灭菌30分钟。

   (4)消毒与接种

   在超净工作台上,用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25~30分钟,灭菌时间快到时,即倾去灭菌溶液,用无菌水涮洗数次,无菌纱布吸干茎段外表水分,按无菌操作要求,接种到小试管里,从芽萌发到芽长到1厘米左右需要2~3周。

   (5)培养

   培养温度21℃最好,最高不超过25℃,有昼夜温差,光照10~12小时/天,光强800~1200lx。

   (二)继代增殖

   (1)将上述无菌芽从原茎段上切下,转接到ms+ba1-2+1aa0.1-0.3或ms+ba1-2+naa0.01-0.1的培养基上,促使嫩茎长出更多的侧芽,原茎段弃去。继代增殖培养基每升用蔗糖30克。

   (2)5周后,“红双喜”增殖了3.5倍,“白雪山”4.1倍,“和平”、“彩云”5~6倍,“皇冠”、“金丝鸟”达15倍。

   (3)每5~6周做一次继代增殖,继代前先制备好培养基,然后在无菌操作条件下,将月季嫩茎切成1~2节一段,投入新鲜的增殖培养基上,月季小苗就会按几何级数增殖起来,也可以将大苗转入到生根培养基上。

   (4)壮苗培养

   ①对增殖倍率高的品种,所增殖的嫩茎很细弱,要求进行一次壮苗培养,以取得适合生根和今后移栽的苗子。壮苗培养的培养基为:ms+ba0.3-0.5+naa0.01-0.1,如果并不特别强调繁殖速度,也可以一直使用这种培养基,以壮苗为主,增殖为辅,使增殖与壮苗合为一步。②培养条件。光照10~12小时/天,光强800~1800lx,温度20~23℃,最高24~26℃。

   (5)生根与移栽

   月季嫩芽生长到一定长度时,就应切割下来,转入生根培养基。切下的嫩芽长度以2~3厘米为宜,让幼苗基部伤口愈合,已长出根原基,幼根尚未长出,即出瓶种植。这种方法不会损伤根系,移栽速度快,成活率高。

   (a)以ms培养基为基础,配方为ms+naa0.5,此外加入300mg/l活性炭,30g/l蔗糖。插植2厘米以上无根嫩茎,经2周左右出现根原基,幼根尚未长出即出瓶种植。

   (b)移栽。幼苗出瓶后,先洗去沾附的琼脂培养基,再种植到粗沙+园田土(1:3)介质中,总的原则是疏松透气,有一定的保水、保肥能力。种植密度2~3厘米×4~6厘米/株,移栽完毕浇透水,并用0.1%的百菌清、多菌灵或甲基托布津等喷雾保苗,能显著提高成活率。

   (c)移栽后管理。移栽后需保持相对湿度85%以上,在温室、拱棚中移栽,覆好遮荫网,一般成活率都比较高,并注意通风和温度管理。4~6周后,须做好第二次移植,通常植入5厘米×9厘米的塑料杯中,每杯种1苗,再经4~6周,地上、地下部分都充分生长,有些植株还能开花,此时即可出售,或上盆种植,利于观赏。

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