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植物组织培养基母液配制

时间:2009-03-31  来源:  编辑:朱腾飞  浏览:920次
植物组织培养基母液配制植物组织培养planttissueculture是指植物的任何器官组织或细胞,在人工预知的控制条件下,放在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中,使其生长分化形成完整植株的过程.植物组织培养具有取材少,培养材料经济,人为控制培养条件,不受自然条件影响,生长周期短,繁殖率高,管理方便,利于自动化控制等特点.因而被广泛应用于各种植物的快速繁殖之中.培养
植物组织培养基母液配制

植物组织培养(planttissueculture)是指植物的任何器官、组织或细胞,在人工预知的控制条件下,放在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中,使其生长、分化形成完整植株的过程.植物组织培养具有取材少,培养材料经济;人为控制培养条件,不受自然条件影响;生长周期短,繁殖率高;管理方便,利于自动化控制等特点.因而被广泛应用于各种植物的快速繁殖之中.

   培养基母液,也叫浓缩贮备液.它是以培养基配方配制成的高倍的浓缩液,不同组分母液,它的浓缩倍数不同,一般最低为10倍,高的有50倍、100倍、200倍,甚至1000倍.母液是一个方法比较简便、用量比较准确且被广泛采用的配制方法.本文就如何掌握培养基母液配制的操作要领作一阐述,以供参考.

   以ms培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类.(见表1) 

君子兰的“湿养”

按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品(如大量元素或微量元素)配在同一母液中(见表1).但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效.为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时,可采用如下2种做法加以解决:①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按“表1”所列药品的先后顺序溶解药品,待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品,以此类推;②使每种成份分别完全溶解,再把它们彼此混合.

   2铁盐母液的配制

   铁盐的成份含硫酸亚铁(feso4·7h2o)和乙二胺四乙酸二钠(na2-edta).这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀.该方法是:分别溶解feso4·7h2o和na2-edta,加热并不断搅拌,使之完全溶解,冷却,将2种溶液混合,调ph至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中.

   3植物生长调节物质母液的配制

   植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的iaa、iba、naa,赤霉素类的ga3,细胞分裂素类的2,4-d、kt和6-ba等.由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同:①iaa,iba和ga3先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后,存放在冰箱中;②naa可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积;③2,4-d可溶于少许1mol·l-1的naoh溶液中,然后加水定容;④kt和6-ba可用少量1mol·l-1的hcl溶解,再加水定容;⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容.

   植物生长调节物质浓度通常用ppm(mg·ml-1)和mol·l-1表示,在配制母液时,常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶.

   4有机附加物母液的配制

   在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性.由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-200c的低温冰箱内.

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