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菊苣组培及无性系建立的研究二

时间:2009-03-28  来源:  编辑:朱腾飞  浏览:758次
把在ms+ba.mg/l+,-d丁酯.mg/l培养基上诱导的浅绿色颗粒状愈伤组织.在同培养基上连续继代培养代.形成的愈伤组织仍为具有分化能力的愈伤组织…这说明ms+bao.mg/l+,d丁酯.mg/l是诱导菊苣叶柄形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基….愈伤组织与不定芽的分化培养培养结果表明培养d左右.有的愈伤组织颗粒形成了绿色的芽点培养到d时进
菊苣组培及无性系建立的研究二

结果与分析 

   1.愈伤组织的诱导

   在不用激素或ba与iaa配合使用条件下.不能诱导叶柄块形成愈伤组织;而浓度分别为0.4mg/l、0.8mg/l、1.2mg/l、1.6mg/l、2.0mg/l的ba与浓度为o.5mg/l、1.0mg/l、1.5mg/l、2.0mg/l和2.5mg/l的naa、2,4一d丁酯配合使用时。几乎所有的叶柄块都能够诱导形成愈伤组织.但诱导的愈伤组织生长速度及外部形态却差异较大。在ba浓度为0.4mg/l、2.4一d丁酯浓度为1.6mg/l的培养基上.不仅愈伤组织的诱导率为98%.愈伤组织的生长速度快.而且所诱导的愈伤组织外观呈淡绿色的颗粒状,愈伤组织颗粒问连接松散、质地疏松。一般认为,这种愈伤组织为具有分化能力的愈伤组织。除ms+ba0.4mg/l+2,4-d丁酯1.6mg/l这一培养基外,在其它培养基上诱导的愈伤组织从形态、结构、颜色和质地等性状上看.均为没有分化能力的愈伤组织或分化能力差的愈伤组织。把在ms+ba0.4mg/l+2,4-d丁酯1.6mg/l培养基上诱导的浅绿色颗粒状愈伤组织.在同一培养基上连续继代培养9代.形成的愈伤组织仍为具有分化能力的愈伤组织。这说明ms+bao.4mg/l+2,4一d丁酯1.6mg/l是诱导菊苣叶柄形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基。

   2.愈伤组织与不定芽的分化培养

   培养结果表明:培养10d左右.有的愈伤组织颗粒形成了绿色的芽点:培养到40d时进行统计.结果如表1所示。由表l可见.只有部分培养基能诱导颗粒状愈伤组织分化。其中在l/2ms+agn0320.5mg/l+ba0.3mg/l+naa0.1mg/l培养基上不仅分化率达98.o%。而且分化的不定芽为高lcm左右、长势较旺盛的丛生状。把分化形成的丛生芽从基部切下.接种到相同堵养基上进行分化不定芽分化继代培养.45d后1个不定芽又会分化形成一丛生长较为旺盛的丛生不定芽.40d时平均分化增殖率为7.2倍。经过连续11次的继代培养.其分化率和长势基本保持不变。由此说明.该研究中菊苣叶柄愈伤组织和不定芽分化的理想培养基为l/2ms+agn0320.5mg/l+bao.3mg/l+naa0.1mg/l。 

   3.生根培养

   由表2可见。在附加naa和iba的生根培养基中.难以诱导生根;在iaa浓度达到和超过0.8mg/l时。也难以诱导生根;而在iaa浓度为0.2~o.4mg/l的生根培养基上.不仅生根率达90%以上.而且单株生根数也达到5.2条以上:并且l/3ms培养基上的生根效果好于1/2ms。观察还表明,在上述1/3ms生根培养基上,不仅生根率高、根数多,而且试管苗长势旺盛,培养至30d时,可以长成株高为3cm左右、具有6条以上根的试管苗。表明。1/3ms+iaa0.2~0.4mg/l是变异菊苣不定芽生根的理想培养基。 

   4.移栽

   由表3可见.以炉灰渣和河沙为移栽基质成活率较高,且长势较好。观察还表明.以炉灰渣为移栽基质时.不仅成活率最高,而且成活苗长势也最好.这说明炉灰渣是菊苣试管苗移栽的理想基质;把在温室中移栽成活试管苗移植到田间.通过3次小批量试验证明.具有优良变异性状的菊苣试管苗长势旺盛而整齐,优良的变异性状保持不变.单位面积可食嫩叶产量比实生苗提高13%~18%。 

    讨论

   迄今为止.虽然已有菊科莴苣属菊苣组织培养的报道。但未见栽培菊苣变异植株组织培养及无性系建立的报道。本研究利用变异菊苣的叶柄为外植体进行了愈伤组织诱导与分化、不定芽分化与生根、试管苗移栽与移植的研究。叶柄愈伤组织能以较高分化率分化出不定芽.证明菊苣的叶柄在离体条件下仍具有较强的生长分化力.这不仅证明栽培菊苣非分生组织细胞也具有全能性.而且还说明,通过组织培养的方法。能使大批栽培中偶尔发生的有利变异植株得到保存.为优良变异品系保存和利用提供了可能.

   对芽进行分化培养.40d时的分化率为7.2,按照这个增殖速度。年增殖率为7.29。这说明,通过这种方法进行快速繁殖。一年内可增殖出大量的具有有利变异性状菊苣试管苗。这为优良植株的工厂化育苗.满足生产上对优良菊苣种苗的需求提供了可能.

   在生根培养时.使用iaa效果较好。这是因为iaa为植物天然生长素在光照条件下分解。把待生根的不定苗接种到以iaa为生长素的生根培养基中,7d左右诱导形成根原基.此时iaa因光照大部分分解.使其含量降低到不至于抑制根的伸长生长的浓度.

   在移栽过程中.炉灰渣为理想的移栽基质,这是因为炉灰渣为黑色物质。具有很好吸光作用,有利于增温,为幼苗生长提供较高温度.并且炉灰渣是经高温炼烧后所得。所带杂菌少.加之其来源较广,四季皆可获得。因此,炉灰渣是变异菊苣试管苗移栽的理想基质。

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